w66最给力的老牌科技可接收各种来源的天然蛋白纯化样品，从中分离纯化出客户所需的目的蛋白。样品的形式包括动植物组织、细胞、菌体、菌体破碎后的上清、变性液、分泌表达液和干粉等。

分离纯化目的蛋白的第一步，就是要把蛋白质从原来的样品中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态，不丢失生物活性。w66最给力的老牌科技能够根据客户的样品形式，选择适当的样品前处理方法。

动物材料先剔除结缔组织和脂肪组织，种子材料先去壳甚至去种皮以免受单宁等物质的污染，油料种子最好先用低沸点的有机溶剂如乙醚等脱脂。然后根据不同的情况，选择适当的方法，将组织和细胞破碎。

动物组织和细胞可用电动捣碎机、匀浆机或超声波处理破碎。植物组织和细胞一般需要用石英砂或玻璃粉和适当的提取液一起研磨，或用纤维素酶处理。破碎细菌细胞壁的常用方法是超声波破碎，与砂研磨、高压挤压或溶菌酶处理等。

组织和细胞破碎后，选择适当的缓冲液把蛋白提取出来。细胞碎片等不溶物用离心或过滤的方法除去。

如果所需蛋白主要集中在某一细胞组分，如细胞核、染色体、核糖体或可溶性细胞质等，则可用差速离心法将它们分开，收集该细胞组分作为后续纯化的材料。如果所需蛋白与细胞膜或膜质细胞器结合，则必须利用超声波或去污剂使膜结构解聚，然后用适当介质提取。

 根据样品类型和目的蛋白的性质，天然蛋白的分离纯化一般分为三种：天然大分子蛋白分离纯化、天然小分子蛋白分离纯化以及混合未知蛋白样品分离纯化。

天然大分子蛋白分离纯化：根据目的蛋白的理化性质，优先进行不同的离子交换层析，摸索不同的缓冲体系并选用适当孔径的分子筛分离纯化。

天然小分子蛋白分离纯化：天然小分子蛋白通常是指经过酶切消化后的不同的天然酶解产物，分子量普遍为10kDa以内，客户需要通过纯化手段获得具有高活性的肽段序列。w66最给力的老牌科技总结多年的纯化经验，一般先通过多级分子筛层析（如S200，S75，G15）除去大分子杂质，然后收集小分子混合物，再使用大孔树脂或反向树脂纯化小分子化合物，进一步通过HPLC和MS/MS对小分子蛋白多肽序列进行鉴定。

混合未知蛋白样品分离纯化：在特殊情况下，客户只能提供样品的活性检测方法，不知道目的蛋白的信息，w66最给力的老牌科技根据目的蛋白的特性制定相应的方案进行分离纯化，最后通过质谱鉴定、活性鉴定等多种方案确认分离产物，得到高纯度具有生物学活性的目的蛋白。

图2：离子交换层析示意图

图3：凝胶过滤层析示意图

w66最给力的老牌科技建立了完善的天然蛋白纯化体系，有多种蛋白纯化方法（亲和色谱、离子交换、分子筛、疏水色谱、HPLC等）可供选择。其中，先进的AKTA纯化系统和多种规格的预装纯化柱能够纯化不同来源的天然蛋白样品，且GE纯化基质已有十多种，能同时大规模、扫描式的进行蛋白纯化和分离工作，获得高纯度的蛋白质，节省客户宝贵的科研时间，满足客户需求。

w66最给力的老牌科技建立的天然蛋白纯化工艺，除了能够选择适宜的纯化技术，还优化了实验参数，将各个纯化步骤以最合理的方式衔接起来，使用最少的纯化步骤、最少的劳动力和最经济的方案，从较少的样品中最大程度的提取目的蛋白，达到蛋白质产量的最大化，并且能够保持蛋白活性，可供客户进行活性测试，以满足实验分析和下游应用要求。同时，能够为客户提供全程可追溯的文件支撑，以满足客户的纯化工艺搭建需求。

案例1：细胞培养添加物纯化

图4 XX蛋白纯化图谱

图5 XX蛋白纯化SDS-PAGE结果

案例2：梨样本纯化

图6 XX蛋白凝胶过滤层析图

图7 XX蛋白纯化SDS-PAGE结果