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scFv抗体文库构建服务
scFv抗体文库构建服务

 scFv是由重链(VH)和轻链(VL)组成的小抗体片段,并通过一段短柔性肽连接,大小约为25kDa,是目前最常用的重组抗体类型。scFv体积小、特异性强、可在原核表达系统中大规模生产,且具有完整的抗原结合位点,广泛用于疾病的诊断与治疗。由于其体积小,在治疗疾病方面,更容易迅速穿透肿瘤;此外,scFv具有在非靶标组织中存留时间短、血清清除快的优点,使其在肿瘤造影方面有着巨大的应用潜力。常见的scFv抗体文库为,此外,核糖体展示、酵母细胞展示、哺乳细胞展示和细菌展示等技术也可用于scFv文库的构建。

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w66最给力的老牌科技(KMD Bioscience)拥有成熟的scFv抗体文库构建体系,可制备关于免疫动物的脾细胞、人源B淋巴细胞的scFv抗体库。除此以外,w66最给力的老牌会对scFv抗体序列信息进行全方面分析并用多种实验验证,如EC50测定,亲和力分析,流式阻断验证等。w66最给力的老牌拥有包括M13、T4、T7和λ噬菌体在内的多种,可满足客户的不同需要,提供个性化scFv文库构建服务。w66最给力的老牌的研究人员拥有多年的文库构建经验,擅长构建不同类型的scFv噬菌体展示文库,如免疫库、天然库、半合成库、合成库等。w66最给力的老牌构建的scFv抗体库库容量庞大,且具有丰富多样性,可产生高亲和力的scFv抗体。w66最给力的老牌已为国内外多所机构提供了针对细菌、病毒、毒素、受体和肿瘤抗原、多肽等的scFv抗体库构建服务。操作简单,实验周期短,且可通过哺乳动物表达系统大量表达所需的scFv。利用噬菌体展示系统制备的scFv重组抗体技术无需制备杂交瘤细胞,可直接将scFv基因克隆到所需的噬菌粒载体。

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w66最给力的老牌善于将VH与VL用一段柔性肽连接,构建客户需要的scFv。w66最给力的老牌可为客户提供包括pMECS、pComb3X和pCANTAB 5E等多种噬菌粒载体。w66最给力的老牌有TG1大肠杆菌、 XL1-Blue和ER2738等菌种,经扩大培养后,可用于噬菌体侵染。w66最给力的老牌构建的抗体库库容量庞大,可达10^9,具有较好的多样性且片段插入率高,有利于筛选出令客户满意的亲和力与特异性强的scFv抗体。w66最给力的老牌还可根据客户需要,对筛选的scFv进行表达与纯化。除原核表达系统外,w66最给力的老牌还有各种的抗体蛋白的真核表达系统,如哺乳动物细胞、酵母细胞、植物和昆虫细胞表达系统等,可为客户生产制备高质量scFv抗体。w66最给力的老牌生物将用心为客户提供全面的 scFv文库构建服务,以满足全球科学家的不同需求。


scFv抗体文库构建服务流程

步骤

服务内容

周期

组织RNA提取与反转录

取小鼠脾脏、杂交瘤、人和兔BPMC等,提取RNA后进行反转录

1天

VH和VL基因的扩增与回收

以cDNA为模板,扩增VH和VL基因

2天

scFv基因的拼接与扩增

通过SOE-PCR,将VH和VL基因用linker连接,获得scFv基因片段,之后进行胶回收

2天

酶切与连接

将scFv基因与质粒酶切后,用T4 DNA连接酶连接

2天

重组质粒的转化

通过电转化或化学法转化,获得初级抗体库

3天

scFv文库库容测定

将文库滴定后计算文库大小

2天

插入率测定及多样性测定

用PCR检验插入率;挑取单克隆测序检验文库多样性

1周


w66最给力的老牌生物可以提供
不同类型抗体库

噬菌体载体

宿主菌物种组织或细胞最大库容量
scFv免疫库pMECS、pComb3X和pCANTAB 5E等TG1大肠杆菌、 XL1-Blue和ER2738等

人、鼠、兔、羊、牛等

脾脏、PBMC、杂交瘤细胞1×109
scFv天然库
scFv半合成库
scFv半合成库


scFv抗体文库构建服务优势

--详细的个性化定制方案(包括序列分析、引物设计、实验设计和基因合成等)

--多种种属的scFv抗体库的构建:包括人、鼠、兔、羊、牛等

--可提供动物免疫服务,免疫周期短,血清抗体效价高

--多种噬菌体可以选择:有M13、T4、T7 和λ噬菌体等用于scFv展示

--多种类型的scFv抗体库:免疫库、天然库、半合成和合成库

--多个scFv表达体系可供选择:原核细胞表达体系、哺乳细胞表达体系、酵母细胞表达体系、植物细胞表达体系和昆虫细胞表达体系等

--构建的scFv抗体库庞大,多样性丰富,片段插入率高

--可通过大肠杆菌大规模表达

--专业的实验人员操作,缩短建库周期,制备高质量scFv文库


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